對(duì)大量和小量酵母菌分別進(jìn)行研磨，進(jìn)而提取其核酸或蛋白。

實(shí)驗(yàn)原理

通過研磨珠的撞擊,，充分破碎酵母菌細(xì)胞壁,，使其內(nèi)容物流出，進(jìn)而提取目標(biāo)成分,。

實(shí)驗(yàn)材料和器具

樣品：酵母菌

儀器：全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀（上海凈信,，Tissuelyser-24）

耗材：離心管，不銹鋼研磨珠（上海凈信,，中號(hào)研磨珠）

實(shí)驗(yàn)步驟

方法1  大量酵母菌的研磨方法

1.1 預(yù)處理研磨罐和研磨珠,，然后放入液氮中冷卻待用。

1.2 把酵母菌樣本一顆一顆滴到干凈的液氮中,，使樣本單個(gè)個(gè)體呈黃豆粒大?。?/p>

1.3 用鑷子把這一顆顆如黃豆大小的酵母菌團(tuán)夾到一個(gè)干凈的燒杯或者其他容器內(nèi),；

1.4 把1.3中樣本一起倒入冷凍待用的研磨罐中,，加入一顆中號(hào)珠子，不用太大也可,；

1.5 把裝好樣本的研磨罐裝入凈信全自動(dòng)樣品研磨機(jī)上,，設(shè)置頻率11單位頻振，20s,，分5-6次研磨,，每次間隔都把研磨罐放入液氮中冷卻；

1.6 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

方法2  少量酵母菌的研磨方法

2.1 直接把樣本加入裝有半管玻璃細(xì)珠的離心管中,；

2.2 把裝好樣本的離心管放入凈信全自動(dòng)樣本研磨機(jī)上，頻率13單位頻振下研磨30s,，休息10s,，再在頻率13單位頻振下研磨30s，切勿連續(xù)研磨60s,，否則導(dǎo)致升溫將影響提取效果,；

2.3 把研磨好的樣本直接加入提取液，繼續(xù)后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1.少量酵母菌研磨好后,，實(shí)驗(yàn)室需要檢驗(yàn)離心管中酵母是否研磨達(dá)到要求，可以采用重疊離心管離心方法：具體步驟為,，取一管研磨好裝有酵母的離心管,，在底部用針或者其他尖銳東西扎一小孔，再在該離心管底部套一新離心管,，一起離心,。后將新離心管中得到的酵母液進(jìn)行鏡檢,，若鏡檢無(wú)完整酵母細(xì)胞,，則研磨效果達(dá)到要求,。

2.如果上述步驟檢測(cè)效果不理想，可以在第一步裝樣本前,，先把酵母樣本放入離心機(jī),，稍微離心，去除上浮液,，再繼續(xù)實(shí)驗(yàn),。