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全自動樣品快速研磨儀在低溫中破碎酵母細(xì)胞

文章來源: 作者:admin 人氣:1015 發(fā)表時(shí)間:2018-06-29 06:35:43

條形酵母是將酵母通過小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的,。將有1mm的篩子扣入到裝有10-20 ml球狀酵母的50ml破碎罐的頂部,,經(jīng)過離心破碎變成了2L的條狀物,。壓力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐內(nèi),條狀可以在-80C°下被保存,。

使用上海凈信Tissuelyser全自動樣品快速研磨儀對酵母進(jìn)行研磨,,將不銹鋼鋼珠和樣本分別裝入研磨鋼罐中,,然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中,,當(dāng)預(yù)冷凍過程結(jié)束后,,時(shí)間一分鐘左右,,或者直到原來沸騰的液體氮恢復(fù)平靜,,將破碎罐從液氮中取出,,并要將破碎罐沾有的液體全部清理干凈,,以避免在破碎過程中發(fā)生爆炸,。研磨鋼罐好用坩堝鉗或大鑷子夾取出來,而且通常要帶經(jīng)過冷凍的手套,,凍傷以免,。

研磨鋼罐中酵母量不要太多,,否則可能會研磨不充分,留有殘?jiān)?,一般為研磨鋼罐?/3左右為宜,,把剛從液氮中取出的鋼罐安裝在凈信Tissuelyser全自動樣本快速研磨儀中,,分5次進(jìn)行研磨,,設(shè)置頻率55hz,20s,,每次間隔都把研磨罐放入液氮中冷卻,。

在每次破碎后都要將破碎罐取下,放入到液氮中進(jìn)行冷凍,,當(dāng)液氮不在沸騰時(shí),,可以將鋼罐取出,破碎可以繼續(xù)進(jìn)行,。

經(jīng)過100秒的破碎后,,我們通過顯微鏡觀察可以發(fā)現(xiàn)95%的酵母已經(jīng)達(dá)到破碎效果,用于下一步的實(shí)驗(yàn)過程,。剩余的酵母可以儲存,備用,。

研磨鋼罐和鋼珠都可重復(fù)利用,,破碎罐和破碎球可以用溫的乙醇清洗,放到干燥處貯存,。

酵母
 

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