如何研磨植物樣品的提取樣品DNA
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發(fā)表時(shí)間:2018-06-29 06:43:28
實(shí)驗(yàn)步驟
方法1 濕磨法
1.取打碎機(jī)適配器于-80°冷凍約15min。
2.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序,,好帶上一片葉子,(材料量可多可少,,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國(guó)產(chǎn)2ml EP管中,,加一粒鋼珠,,液氮速凍。之后用鑷子取出,,快速加入適配器中,。(好用國(guó)產(chǎn)的EP管即可,進(jìn)口的管子液氮凍過(guò)后,,容易裂),。
3.打碎15s,10單位頻振,。(水稻嫩葉為,。45S,12單位頻振 老葉為,,70S 12單位頻振 ),。
4.將材料再次放入液氮中。
5.用磁鐵吸出鋼珠,,加入1研磨單位Trizol,,余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
方法2 干磨法
1.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),,放入國(guó)產(chǎn)2研磨單位EP管中,,加一粒鋼珠,400ul Trizol,。
2.打碎1min 10單位頻振(水稻嫩葉為,。45S,2單位頻振 老葉為,,70S 2單位頻振 ) ,。
3.吸出鋼珠,補(bǔ)0.12mlTrizol,。
4.余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
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